疗效研究
益智康脑丸成分中肉从蓉总甙对小鼠组织的抗氧化作用
日期:2012-12-27 10:48
王晓雯 李琳琳 木胡牙提 王雪飞 堵年生
摘要目的:研究肉欢蓉总试 ( GCS)对小鼠组织的抗氧化作用。方法:采用邻苯三酚自氧化、硫代巴比妥酸;TBA)和荧光法.分别测定小鼠心、肝、脑、肾组织中SOD活性、MDA及脂褐质含量。结果:GCS(125mg
关键词:肉苁蓉总甙 超氧化物歧化酶 丙二醛 脂褐质 抗氧化
肉从蓉Cistanch.e salsa(c. A. IVIey.)G.Beck.有补中益气,益精,壮阳之功效,在历代抗老延年古方中出现的机率仅次于人参。近代药理研究,肉从蓉有增强机体免疫功能[1],促进记忆,提高智能[2],抗衰老[3]等作用。肉从蓉粗制剂显著降低心肌脂褐质含量[3]。本文主要研究肉灰蓉总贰( GcS)对小鼠心、肝、脑、肾组织的抗氧化作用及脂褐质含量的影响。
1材料
1.1药材及试剂肉从蓉总贰由新疆医学院药学系植化室提取并鉴定[4]。邻苯三酚。遵义
市第二化工厂生产;硫代巴比妥酸,上海试剂二厂生产;奎宁,上海试剂二厂;1, 1, 3, 3-四乙氧基烷(TEP)。考马斯亮蓝均为Sigma公司产品。
1.}动物VIH种小鼠,由新疆地方病研究所动物实验中心提供。
2方法与结果
Z.1 GCS对小鼠组织中5QD活性及MDA含量的影响选5月龄i}1IH健康小鼠40只,体重(33.5 1 2)g,雌雄兼用,依体重均衡随机分成生理盐水对照组〔NS)和不同剂量GCS组(62 .5, 125* 250mg·kg-1·d-1,ig ),连续30d;
另设1月龄NIH幼年小鼠10只,体重(15.2士1.5)g,ig同体积NS,每天1次,连续30d,各组于末次给药后1.5h,脱颈椎处死,开胸腹,立即取出心、肝、脑、肾组织,用冷冻NS冲洗,组织称重,研磨,制备组织匀浆,3000r " min-离心30min-1,取其上清液备测,采用邻苯三酚自氧化法测定组织SOD活性[5].用TBA显色法测组织MDA含量[6].用考马斯亮蓝法测定组织蛋白[7]。
结果表明5’月龄NS组小鼠心、肝组织中SOD活性明显低于1月龄NS组,各组织MDA含量明显高于1月龄NS组,GCS组与5月龄NS组比较,250mg " kg一‘时显著提高心、肝组织中”D活性,接近1月龄组;125, 250mg " kg一’组均降低心、肝组织中MDA含量,接近1月龄组:125, 250mg " kg”组显著提高脑、肾组织中SOD活性,并显著降低MDA含量,接近1月龄组(表1}
a . z Gcs对小鼠组织脂褐质含量的影响选健康5月龄NIH种小鼠as只,体重(3211.5)g,雌雄兼用,依体重均衡分成4组,:VS对照组和不同剂量GCS组(62. 5, 125, 250mg " kg一‘·d一 1, ig),连续30d,另设1月龄NIH种小鼠la只,体重〔151 1. 5)g,啥同体积NS,每天1次,连续Sad,各组于末次给药后1.5h,脱颈椎处死,分别取心、肝、脑、肾组织,用滤纸吸干水分,称取各组织0.2g,按Sohal}$]方法,将组织用氯仿.甲醇X2:1)混合液分次制成8m1匀浆,置40℃水浴温育Smin, 3000r " min一‘离心14min,取氯仿层于岛津RF-540型荧光分光光度仪,激发波长352 . 6nm,发射波长451. Lnm,测荧光强度,按硫酸奎宁卜g"ml-‘的荧光强度为I00单位,计算每克湿组织的荧光计数单位,以u"g一‘表示。
结果见表2,各组均与5月龄小鼠IV5组比较,1月龄IBS组,肝、脑组织中脂褐质含量明显低于5月龄NS组。GC5 250mg " kg‘组明显降低心脏组织中脂褐质含量,125.250mg " kg-1时均明显降低肝、肾组织中脂褐质含量,250mg kg一‘时降低更明显。
3讨论
衰老的自由基学说认为,随着增龄,体内自由基的产生与消除失平衡,使自由基清除酶SOD活性降低,使生物膜发生脂质过氧化,破坏了生物大分子的结构和功能,使体内主要脏器心、肝、脑、肾等受损。另外,脂褐质是自由基氧化作用的产物,其在组织内含量与脂质过氧化反应呈正相关,是衰老的一项指标。因此,维持体内自由基的稳态和平衡,消除有害的自由基反应,中断脂质过氧化,减少脂质过氧化产物,对延缓衰老十分重要,这有赖于提高自由基清除酶系统活性。目前研究认为多数中药的抗衰老作用机制可能与其抗氧化作用有关[9]。本文研究发现肉从蓉中的有效成分肉从蓉总贰能明显提高5月龄小鼠心、肝、脑、肾组织中自由基清除酶SOD活性,对脑、肾组织作用敏感。并降低上述组织中11}iDA及脂褐质含量。提示GCS具有抗氧化作用及抗衰老作用。